PCR法

最近ホットな話題だと思われるので、しっかり何をしているのか、どんな手順でしているのか、理解しておきましょう！

PCR法とは

微量のDNAから特定領域のDNAを短時間で大量に増幅する方法。 Polymerase Chain Reactionの略。ポリメラーゼ連鎖反応法ともいう。

例えば、ある遺伝子があるかどうか調べたいとき、遺伝子自体が少ししかないと見つけにくいので、見つけやすくするために、調べたい部分だけを増やす。その方法がPCR法なのだ。

PCR法の3段階の手順はしっかり押さえておこう！

以下の3つの手順を何回も繰り返す。

１．反応液を95℃に加熱 (30秒) 目的：2本鎖をほどき、1本鎖にする。

２．40～60℃に下げる (30秒) 目的：DNAプライマーを結合させる。

３．72℃に上げる (2分) 目的：DNAポリメラーゼをはたらかせ、DNAの複製を進める。

この３ステップを何度か繰り返すと、２～３時間ほどで、約100万倍にまで目的の遺伝子を増やすことができるのです！

ｎ回繰り返すと、増やしたい長さの遺伝子は何本つくられるでしょう？

これよく聞かれるんよね。

3回目まで実際に見てみて、そっから考えてみよう！

増やしたい領域は、点線の間の部分だから、 1回の複製では、目的の長さのDNAはひとつもできないのです。

次に、今できた4本のDNAにそれぞれプラーマーがくっつき、（ぐるぐるしてる部分）そこから新たに4本のDNAが複製される。

ここで、初めて、増やしたい長さのDNAが2本できるのです⋯！（右のぐるぐるしてる部分）

PCR3...png

ちょっと書くのが大変なので、省略するね。

オレンジで書いたのが、3回目に新しく複製されたDNAです。そしたら、3回目までで、増やしたい長さのDNAは8本できるのがわかるはず。（星マークつけてる8本）

さて。ここまでの流れから、ｎ回繰り返すと、増やしたい長さの遺伝子は何本つくられるのか、考えてみよう。

n回複製されたとき、 DNAの本数すべてを合わせると、　　本になる。・・・①

そのうち、一番初めからあったDNAが　本、・・・②

1回目で新しく複製されたような、目的より少し長い長さのDNAは、 1回の複製ごとに2本ずつ作られるので、 n回複製されたときは、　本・・・③

それ以外が増やしたい長さのDNAなので、 $① ② ③$ 　をすれば、求めることができる。

よって、n回複製したときの増やしたい長さのDNAの本数は、

という式で求めることができる。

よくだと勘違いしている人がいるので、注意してね！！

動画で学びたい人は、「おうち生物 28. PCRと電気泳動」をチェック！